Investigation of Chagas disease within the same family: case study / Investigação da doença de Chagas em um mesmo núcleo familiar: estudo de caso

ABSTRACT Chagas disease (CD) is a neglected endemic disease. Its classic form of transmission occurs through hematophagous triatomine insects. Its classic form of transmission occurs through hematophagous triatomine insects. There are cases of the disease in non-endemic regions that occur through alternative transmissions, as this possibility also exists. The aim of this study was to report a case among members of a same family (born and resident in Taquarituba, São Paulo, Brazil) diagnosed with CD. The family matriarch lived in a mud house in the countryside and reported contact with the triatomine during childhood. Two grown-up children are also seroreactive; both reported not having contact with the insect as children. Medical record analyzes and new laboratory tests were performed. Clinical history and recent tests have confirmed positivity for CD in the matriarch and her grown-up children. Parasitological techniques have shown negative results, evidencing that they are in the chronic form of the disease. Congenital transmission may have occurred between them, as well as the possibility of vector transmission by secondary species cannot be ruled out, since the patients come from a municipality considered endemic for CD in the past.

RESUMEN La enfermedadde Chagas (EC) es una infección endémica que ha sido descuidada. Su forma clásica de transmisión ocurre mediante insectos triatominos hematófagos. Hay casos de la enfermedad en regiones no endémicas que ocurrieron por vías alternativas de transmisión, puesto que también hay esa posibilidad. El objetivo de este estudio fue reportar un caso de miembros de una misma familia diagnosticados con EC. La matriarca de la familia vivía en una casa hecha de barro en la zona ruraly reportó contacto con el triatomino en su infancia. Dos hijosson también sero-reactivos, pero no reportaron contacto con el insecto cuando eran ninos. Se hicieron análisis de historial médico y nuevaspruebas de laboratorio. El histórico clínico y laspruebas recientes confirmaran la positividad para EC, tanto en la madre como en los hijos. Las técnicasparasitológicas demostraron resultados negativos, comprobando la forma crónica de la enfermedad. Transmisión congénitapuede haber ocurrido entre ellos, así como no se puede descartar la posibilidad de ocurrencia de transmisión vectorial por especies secundarias, ya que los pacientes proceden de un municipio que fue considerado endémico para EC en el pasado.

RESUMO A doença de Chagas (DC) é uma enfermidade endêmica negligenciada. Sua forma clássica de transmissão ocorre por meio de insetos triatomíneos hematófagos. Há casos da doença em regiões não endêmicas ocorridos por transmissões alternativas, uma vez que também existe essa possibilidade. O objetivo deste estudo foi relatar um caso de membros da mesma família (natural e residente em Taquarituba, São Paulo, Brasil) diagnosticados com DC. A matriarca da família morava em uma casa de barro na zona rural e relatou contato com o triatomíneo na infância. Dois filhos também são sororreagentes; ambos relataram não terem tido contato com o inseto quando crianças. Análises de prontuário e novos testes laboratoriais foram feitos. O histórico clínico e os recentes exames confirmaram a positividade para DC, tanto na mãe quanto nos filhos. As técnicas parasitológicas demonstraram resultados negativos, constatando forma crônica da doença. Transmissão congênita pode ter ocorrido entre eles, assim como também não se pode descartar a possibilidade de ocorrência de transmissão vetorial por espécies secundárias, visto que os pacientes são oriundos de um município considerado endêmico para DC no passado.

Molecular epidemiology of Anaplasma platys, Ehrlichia canis and Babesia vogeli in stray dogs in Paraná, Brazil / Epidemiologia molecular de Anaplasma platys, Ehrlichia canis e Babesia vogeli em cães não domiciliados do Paraná

Hemoparasitic infections are tick-borne diseases, which affect animals and humans. Considering the importance of canine hemoparasitic infections in veterinary clinics, this study aimed to determine the occurrence of Anaplasma platys, Ehrlichia canis and Babesia vogeli in blood samples from 182 dogs not domiciled in the city of Pato Branco, southwestern region of Paraná State, Brazil, using polymerase chain reaction (PCR). The prevalence of A. platys and B. vogeli was 32.9% and 10.9% respectively, and A. platys infection prevailed (p<0.001). The number of dogs positive for A. platys was larger in Winter (p<0.05). All blood samples were negative for E. canis. In the dogs, infestation by Amblyomma cajennense predominated over that by Rhipicephalus sanguineus (p<0.001); but there was no significant association between PCR and the variables presence of ticks, sex and age. Dogs infected by A. platys and B. vogeli showed thrombocytopenia, lymphopenia and leukocytosis; but there was no correlation between such hematological changes and infection by hemoparasites. This appears to be the first molecular study that demonstrates the existence of A. platys and B. vogeli in dogs from the southwestern region of Paraná.(AU)

As hemoparasitoses são enfermidades transmitidas por carrapatos que afetam os animais e os humanos. Considerando a importância das hemoparasitoses caninas na clínica médica veterinária, este estudo objetivou determinar a ocorrência de Anaplasma platys, Ehrlichia canis e Babesia vogeli em amostras de sangue de 182 cães não domiciliados do município de Pato Branco, região sudoeste paranaense, Brasil, utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). A prevalência de A. platys e B. vogeli foi de 32,9% e 10.9%, respectivamente, predominando a infecção por A. platys (p<0,001). Constatou-se um maior número de cães positivos para A. platys no período do inverno (p<0.05). Todas as amostras de sangue foram negativas para E. canis. Nos cães, a infestação por Amblyomma cajennense prevaleceu sobre a infestação por Rhipicephalus sanguineus (p<0,001), mas não foi observada associação significativa entre a PCR e as variáveis presença de carrapatos, sexo e idade. Cães infectados por A. platys e B. vogeli apresentaram trombocitopenia, linfopenia e leucocitose, porém não houve correlação destas alterações hematológicas com a infecção pelos hemoparasitas. Este é o primeiro estudo molecular que demonstra a existência de A. platys e de B. vogeli em cães da região sudoeste paranaense.(AU)

Leptospira spp. infection in sheep herds in southeast Brazil

With the aim of studying Leptospira spp. infection in sheep herds, blood samples and respective kidney and liver fragments were collected from 100 animals from twenty different properties during slaughter at a meat company in the Sorocaba region, São Paulo state, southeast Brazil. The microscopic agglutination test (MAT) was performed with 29 strains of Leptospira spp. To identify the agent in the liver and kidney, 100 samples of each tissue were submitted to culture in Fletcher medium and analyzed by the polymerase chain reaction (PCR) for Leptospira spp.

Leptospira spp. infection in sheep herds in southeast Brazil

With the aim of studying Leptospira spp. infection in sheep herds, blood samples and respective kidney and liver fragments were collected from 100 animals from twenty different properties during slaughter at a meat company in the Sorocaba region, São Paulo state, southeast Brazil. The microscopic agglutination test (MAT) was performed with 29 strains of Leptospira spp. To identify the agent in the liver and kidney, 100 samples of each tissue were submitted to culture in Fletcher medium and analyzed by the polymerase chain reaction (PCR) for Leptospira spp.

Molecular epidemiology and extended-spectrum Beta-lactamases production of Klebsiella pneumoniae isolated from three dairy herds / Epidemiologia molecular e produção de Beta- lac-tamases de espectro estendido de Klebsiella pneumoniae isoladas de três propriedades leiteiras

The objectives of this study were to isolate Klebsiella pneumoniae from different sources in three dairy cattle herds, to use the pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) to measure genotypic similarities between isolates within a dairy herd, to verify the production of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) by the double-disk synergy test (DDST), and to use the PCR to detect the main ESBLs subgroups genes. Three dairy farms were selected based on previous mastitis outbreaks caused by K. pneumoniae. Milk samples were collected from lactating cows and from the bulk tank. Swabs were performed in different locations, including milking parlors, waiting room, soil, animal's hind limbs and rectum. K. pneumoniae was isolated from 27 cases of intramammary infections (IMI) and from 41 swabs. For farm A isolates from IMI and bulk tank were considered of the same PGFE subtype. One isolate from a bulk tank, three from IMI cases and four from environmental samples were positive in the DDST test. All eight DDST positive isolates harbored the bla shv gene, one harbored the bla tem gene, and three harbored the bla ctx-m gene, including the bulk tank isolate. Our study confirms that ESBL producing bacteria is present in different locations in dairy farms, and may be responsible for IMI. The detection of ESBLs on dairy herds could be a major concern for both public and animal health.

Os objetivos deste estudo foram isolar Klebsiella pneumoniae de diferentes localidades em três propriedades leiteiras, utilizar a eletroforese em campo pulsátil para averiguar similaridades genotípicas entre os isolados de uma mesma propriedade, verificar a produção de beta-lactamases de espectro estendido (ESBLs) pela prova da disco-difusão dupla associada (DDST) e utilizar a PCR para detecção dos principais subgrupos genéticos de ESBLs. Três propriedades leiteiras foram selecionadas baseando-se em surtos prévios de mastites causadas por K. pneumoniae. Amostras de leite foram coletadas de vacas em lactação e do tanque de expansão. Swabs foram realizados em diferentes localidades, incluindo salas de lactação, salas de espera, solo, reto e membros posteriores de animais. K. pneumoniae foi isolada de 27 casos de infecções intramamária (IMI) e de 41 swabs. Para a propriedade A os isolados de IMI e do tanque de expansão foram considerados do mesmo subtipo molecular. Um isolado do tanque de expansão, três de casos de IMI e quatro de amostras ambientais foram considerados positivos no teste da DDST. Todos os oito isolados DDST positivos portavam o gene bla shv, um portava o gene bla tem, e três portavam o gene bla ctx-m, incluindo um isolado de tanque de expansão. Nosso estudo confirma que bactérias produtoras de ESBLs estão presentes em diferentes localidades em propriedades leiteiras, e podem ser responsáveis por quadros de IMI. A detecção de ESBLs em propriedades leiteiras pode representar uma grande preocupação para saúde pública e para a saúde animal.

Aspectos microbiológicos e de qualidade do leite bovino / Quality and microbiological aspects of bovine milk

A mastite é a principal afecção do gado leiteiro, possui alta prevalência, e constitui um fator limitante em muitas propriedades rurais do país, devido às perdas econômicas. Considerando-se a complexidade etiológica das mastites o objetivo do presente trabalho foi estudar os agentes de etiológicos desta enfermidade e a sua influência na qualidade do leite bovino. Para tanto, foram avaliados um total de 1090 tetos de animais de dez propriedades rurais localizadas no estado de São Paulo. A análise microbiológica do leite consistiu em cultivar uma alíquota de 0,1mL de leite de cada amostra positiva ao CMT, ou com mastite clínica, em meio de ágar base adicionado de 5 por cento de sangue ovino e em agar Mac Conkey, incubando-se as placas a 37°C com observação do desenvolvimento microbiano a cada 24 horas durante três dias. Os microrganismos com maior frequência na mastite foram Corynebacterium bovis(29,52 por cento), Streptococcus dysgalactiae (11,9 por cento) e Staphylococcus aureus (10,48 por cento). Houve ainda o isolamento em ágar Sabouraud dextrose de Candida krusei e Trichosporum spp. As médias de CCS e UFC dos animais foram variáveis e oito (80 por cento) propriedades encontram-se dentro dos limites estabelecidos para CCS pela Instrução Normativa n° 51 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, e todas as propriedades se encontram dentro dos limites para UFC. Houve correlação positiva entre UFC e CCS de leite em duas propriedades entre as seis analisadas estatisticamente. Conclui-se que a mastite é um dos fatores que não permitem que o produtor atinja a qualidade exigida pelo governo. Falhas de manejo e higiene existem e devem ser corrigidas com treinamento dos produtores para aplicação de boas práticas de produção. Finalmente, o monitoramento das mastites e da qualidade do leite nos rebanhos deve ser realizado, e técnicas acessíveis como a CCS composta podem ser utilizadas.

Mastitis is the main disease in dairy herds, presents high prevalence and constitutes a limiting factor on many farms in Brazil due to economic losses. Considering the etiological complexity of mastitis the present work aimed to study the etiological agents of mastitis and its influence on the quality of bovine milk. For this, a total of 1090 teats from dairy cows of 10 farms localized in São Paulo state were evaluated. The microbiological analysis of milk consisted of cultivating an 0.1mL aliquot of milk from each CMT-positive sample, or with clinical mastitis, on agar base medium containing 5 percent of ovine blood and on McConkey agar, incubating plates at 37°C with observation of the microbial development at 24-hour intervals during three days. The microorganisms with highest frequency in mastitis were Corynebacterium bovis (29.52 percent), Streptococcus dysgalactiae (11.9 percent) and Staphylococcus aureus (10.48 percent). There was isolation of Candida krusei e Trichosporum spp. on Sabouraud dextrose agar. The averages of SCC and CFU from cows were variabl: eight (80 percent) farms were found to be within the limits established by regulation "Instrução Normativa nº 51" of the Ministry of Agriculture, and all farms were found to be within the limits for CFU. There was a positive correlation between CFU and SCC from milk in two of six farms statistically analyzed. It was concluded that mastitis is one of the factors that do not allow producer to reach the quality required by the government. Management and hygiene failures exist and must be corrected with instructions for the application of good production practices. Finally, monitoring of mastitis and milk quality in herds must be carried out, and accessible techniques as compound SCC can be used.

Comparison of wildlife and captivity rattlesnakes (Crotalus durissus terrificus) microbiota / Comparação da microbiota de cascavéis (Crotalus durissus terrificus) de vida-livre e cativeiro

The study evaluated and compared the aerobic microbiota from the oral cavity, cloaca and venom of Crotalus durissus terrificus snakes, recently caught from the wild and kept under quarantine (WQ), individual captivity (IC) and collective captivity (CC). Antimicrobial drug effectiveness on isolated agents also was assayed. From group I, II and III were isolated, respectively, 29 (63.04 percent), 38 (90.48 percent) and 21 (42.86 percent) microorganisms from the cloaca; 15 (32.61 percent), 3 (7.14 percent) and 25 (51.02 percent) microorganisms from the oral cavity; and, 2 (4.35 percent), 1 (2.38 percent) and 3 (6.12 percent) microorganisms from venom. The most frequent bacteria were Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris and Morganella morganii, with sensitivity to amikacin, gentamicin, norfloxacin, sulfazotrin and tobramycin. Snakes kept in semi-open captivity exhibited the fewest microorganisms in oral cavities, perhaps due to the environment in captivity, with different temperature gradients, running water, absence of daily handling, circulating air, possibility of moving around, daily cleaning, and sunlight access.

Este estudo avaliou e comparou a microflora aeróbica da cavidade oral, cloaca e veneno de serpentes Crotalus durissus terrificus recém-capturadas da natureza e mantidas sob quarentena (WQ), mantidas em cativeiro coletivo (CC) e em cativeiro individual (IC). A eficácia de drogas antimicrobianas de agentes isolados foi também avaliada. Foram isolados microorganismos dos grupos I, II e III respectivamente: 29 (63.04 por cento), 38 (90.48 por cento) e 21 (42.86 por cento) da cloaca; 15 (32.61 por cento), 3 (7.14 por cento) e 25 (51.02 por cento) da cavidade oral, e finalmente 2 (4.35 por cento), 1 (2.38 por cento) e 3 (6.12 por cento) do veneno. As bactérias mais frequentes foram Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris e Morganella morganii, com sensibilidade para amikacina, gentamicina, norfloxacina, sulfazotrina e tobramicina. Serpentes mantidas no cativeiro semi-aberto mostraram menor número de agentes infecciosos em cavidade oral, talvez devido ao ambiente de cativeiro com diferentes gradientes de temperatura, água corrente, ausência de manejo diário, ampla circulação de ar, possibilidade de movimentação pelos animais, limpeza diária e acesso ao Sol.